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细胞外囊泡

细胞外囊泡(EV;包括经典外泌体、非经典外泌体、微囊泡、大肿瘤体、凋亡小体、凋亡囊泡、自噬性胞外囊泡、两性体和 ARRM)是释放到细胞外环境中的 40-1000 nm 的膜囊泡和来自大多数细胞类型的体液,包括红细胞、血小板、淋巴细胞、树突细胞、内皮细胞和肿瘤细胞。这些囊泡根据其分泌机制分为两种类型。因此,经典外泌体是在多泡内体中形成的,而微泡起源于直接从质膜出芽。尽管经典外泌体成分因其起源细胞类型而异,但某些分子似乎很可能是共享的,无论它们的起源如何。这些分子包括四跨膜蛋白(CD9、CD63 和 CD81),它们被认为是经典外泌体生物发生机制的重要组成部分。 CD9、CD63 和 CD81 用于分离和表征经典外泌体制剂的纯度。

外泌体

外泌体是 30 至 100 nm 的膜包裹囊泡,含有蛋白质和核酸,由各种细胞分泌。通过进入循环,它们可以将信号传输到遥远位置的细胞。已经观察到通过外泌体进行的细胞间通讯与抗原呈递、细胞凋亡、炎症、肿瘤进展和恶性转化有关。预计外泌体将在各个领域发挥重要作用,例如在药物递送系统的开发中。

在过去的十年中,外泌体作为 microRNA (miRNA) 载体、疾病生物标志物和潜在的治疗药物递送载体一直是人们关注的焦点。尽管外泌体很重要,但它们的分离和表征仍然被认为是主要的科学挑战,尤其是在转化为临床需求时。经典地,外泌体和其他 EV 已通过超速离心纯化。技术挑战、时间和成本导致替代纯化方法激增,例如切向流过滤 (TFF)、尺寸排阻色谱 (SEC)、免疫亲和和化学沉淀 

Biogenesis and Components of EVs

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A. Microvesicle (MV) biogenesis comprises several steps, including plasma membrane reorganization, redistribution of phospholipids, outward repositioning of phosphatidylserine, disassembly of the cytoskeleton network, and actomyosin basal abscission. B. Exosome biogenesis starts inward of the plasma membrane to form early endosomes. Intraluminal vesicles (ILVs) are formed, and the endosomes mature to multivesicular bodies (MVBs). MVBs fuse with the plasma membrane to release ILVs into the extracellular space, where they are then referred to as exosomes. Alternatively, the MVBs can fuse with lysosomes, resulting in the degradation of ILVs. C. EVs can contain nucleic acids (DNA and/or RNA), membrane anchored-proteins, cytosolic proteins, and lipids; these contents can vary depending on the releasing cell types and their conditions. (Source: Yokoi and T. Ochiya; 2021)

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